在醫(yī)療領(lǐng)域，細(xì)菌內(nèi)毒素（Bacterial Endotoxin）是潛藏在醫(yī)療器械中的重大安全隱患，其存在于革蘭氏陰性菌的細(xì)胞壁外膜中。天然的細(xì)菌內(nèi)毒素含有多種成分，包括磷脂、脂蛋白和脂多糖（LPS）。脂多糖是內(nèi)毒素的生物活性成分，具有極強的致熱性和生物活性，即使細(xì)菌被滅活后仍可能殘留。細(xì)菌內(nèi)毒素一旦進(jìn)入人體，可能引發(fā)人體免疫反應(yīng)，導(dǎo)致發(fā)熱、休克甚至死亡。因此，細(xì)菌內(nèi)毒素檢查（BET）是醫(yī)療器械質(zhì)量控制中不可或缺的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。
細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法是利用鱟試劑來檢測或量化由革蘭氏陰性菌產(chǎn)生的細(xì)菌內(nèi)毒素，以判斷供試品中細(xì)菌內(nèi)毒素的限量是否符合規(guī)定的一種方法。細(xì)菌內(nèi)毒素檢查主要包括6種方法（見圖2）。值得注意的是，重組C因子法作為細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法的補充方法，不僅避免了傳統(tǒng)鱟試劑對鱟資源的依賴，還具有更高的特異性，正逐步在醫(yī)療器械檢測領(lǐng)域得到應(yīng)用。在實際檢測工作中，應(yīng)基于供試品的性質(zhì)、實驗室能力及經(jīng)驗、數(shù)據(jù)處理要求等科學(xué)合理地選擇最適合的檢查方法。
鱟血變形細(xì)胞裂解液中有一系列絲氨酸蛋白酶，如 C 因子、B 因子，凝固酶原、凝固蛋白原等，均能被細(xì)菌內(nèi)毒素激活。細(xì)菌內(nèi)毒素通過激活 C 因子，活化的 C 因子又激活 B 因子，進(jìn)而激活凝固酶原，使其轉(zhuǎn)化為凝固酶，隨后凝固蛋白原聚合成凝固蛋白，在該酶的催化下凝固蛋白聚集產(chǎn)生凝膠�；谏鲜鲈恚z法通過是否產(chǎn)生凝膠對細(xì)菌內(nèi)毒素進(jìn)行定性檢測；濁度法通過形成凝膠時溶液的濁度變化速率對細(xì)菌內(nèi)毒素進(jìn)行定量檢測；顯色法通過對顯色底物釋放的呈色團的檢測從而對細(xì)菌內(nèi)毒素進(jìn)行定量檢測。（各方法檢查原理見圖3）
醫(yī)療器械細(xì)菌內(nèi)毒素檢查所涉及的國內(nèi)外標(biāo)準(zhǔn)主要包括USP <161>、ISO 11737-3、ANSI/AAMI ST72:2019、GB/T 14233.3-2024，但以上標(biāo)準(zhǔn)均不是特定產(chǎn)品的具體試驗方法，在實際應(yīng)用中，可參考以上標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)合具體產(chǎn)品的特性進(jìn)行方法開發(fā)和確認(rèn)。在完成方法確認(rèn)后，采用經(jīng)確認(rèn)的方法進(jìn)行細(xì)菌內(nèi)毒素的常規(guī)檢測。
山東省醫(yī)療器械和藥品包裝檢驗研究院在無菌醫(yī)療器械污染控制策略研究領(lǐng)域具有豐富的研究經(jīng)驗和較強的技術(shù)服務(wù)能力，可以根據(jù)不同產(chǎn)品特點為無菌醫(yī)療器械生產(chǎn)企業(yè)量身定制細(xì)菌內(nèi)毒素檢查方法學(xué)開發(fā)和確認(rèn)等服務(wù)，助力無菌醫(yī)療器械生產(chǎn)企業(yè)全生命周期微生物質(zhì)量管理。
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